HCV是丙型肝炎的病原体,感染HCV后常导致慢性肝炎和肝硬化,并与肝癌有关。HCV主要经血液传播,占输血后肝炎的90%。抗HCV检查是诊断丙肝的主要依据。
用酶标仪检测,以OPD-H2O2为底物,用492nm;3,3′,5,5′四甲基联苯胺(TMB)-H2O2用450nm。空白孔校零,读取各管吸光度值。P/N≥2.1为阳性,否则为阴性。
抗-HCV-IgG、IgM抗体均为非保护性抗体,急性期多为IgM型,慢性期多为IgG型,其检测是诊断急、慢性丙型肝炎的重要指标。恢复期患者抗HCV多为IgG型,且滴度较低。抗HCV-IgM阳性可确诊HCV早期感染。
本试验阳性仅为初筛阳性,对一些弱阳性受检样品,应重复测定或进行确证试验。
化验取材:血液
丙型肝炎病毒抗体免疫球蛋白G的测定原理:用基因工程表达或人合成的HCV特异性多肽抗原包被微孔,待检血清中抗HCV IgG与之结合,再用酶标抗人IgG检测抗体,使底物呈色。
试剂:国内有成套试剂盒。必须使用“中国药品生物制品检定所检定合格”的试剂。含有包被抗原的微孔板、封闭液、洗液、样品稀释液、酶标抗体、底物A、B液等。
操作方法:按试剂盒说明书操作参考以下方法:向每孔加样品稀释液100μl,待检血清5μl。同时设阴、阳性及空白对照,振摇混匀,置37℃20min,洗4次,风干。加酶标羊抗人IgG100μl 37℃20min,洗4次,风干。加底物A、B液各1滴(50μl),轻轻混匀后,在室温(15~30℃)避光静置15min。加2mol/L H2SO4 50μl终止反应。