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化验检查
phi(φ)小体染色
介绍:

  

  白血病细胞胞质中的φ小体与3,3′-二氨基联苯胺(DAB)、过氧化氢基质液作用,以及硝酸酮处理的过氧化氢酶染色,可催化DAB氧化生成蓝色沉淀,定位在胞质内。

正常值:

  

  光镜下φ小体呈棕色细棒状或纺锤形、大圆颗粒形,1条或多条。

临床意义:

  

  主要见于急性髓性白血病(急粒、急性早幼粒、急性单核细胞白血病)患者的原、幼细胞,以及一些慢粒的“髓性”急变者的原、幼细胞中。

注意事项:

  

  Φ小体染色具有很强的病理意义,有助于白血病类型的鉴别。

检查过程:


    (1)DAB染色步骤:干燥骨髓(血)片用戊二醛-甲醛固定液固定2min,生理盐水漂洗后保存于盐水内直至下一步染色止。置基质液中孵育3min,0.05mol/L Tris-HCl(pH7.3~7.6)快速漂洗3次,置5.0g/L,硝酸铜液内2min,生理盐水漂洗,干后直接镜检或经复染后镜检。

    (2)改良巴氏复染步骤:

    ①DAB染色完毕后标本仍保存于生理盐水中,直至下步染色开始。

    ②在苏木精染液内染1min,取出后水洗。

    ③浸入稀盐酸乙醇液内0.5min,水洗2min。

    ④稀碳酸锂内1min,水洗2min。

    ⑤依次在50%、70%、80%、95%乙醇内脱水各0.5min。

    ⑥在橘黄G6中染1min。

    ⑦95%乙醇内浸洗2次,每次10s。

    ⑧在EA50液内染10min。

    ⑨95%乙醇内浸洗2次,每次3min。

    ⑩无水乙醇内浸洗2次,每次1min。