通常情况下微生物、宿主和外界环境三者保持着一种生态平衡关系。如三者出现生态失调,称为菌群失调。
正常人肠道中的菌群,主要为厌氧菌,少数为需氧菌,前者约为后者的 100倍。存在于肠道的正常菌群为类杆菌、乳杆菌、大肠杆菌和肠球菌等,尚有少数过路菌,如金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、副大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、产气荚膜杆菌、白色念珠菌等。在正常情况下,这些微生物互相依存,互相制约,维持平衡,保持一定的数量和比例。在人体抵抗力降低的情况下,如瘦弱婴幼儿,年老体弱和患急、慢性疾病者,以及长期、大量使用广谱抗生素、免疫抑制剂、肾上腺皮质激素、抗肿瘤药物和放射治疗者,尤其是应用广谱抗生素者。
粪便中细菌极多,占干重的1/3,多属正常菌群。
健康婴幼儿粪便中主要有双歧杆菌、拟杆菌、肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌等。
成人粪便中以大肠埃希菌、厌氧菌和肠球菌为主要菌群,约占80%;产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌等多为过路菌,不超过10%。
芽胞菌(如梭状菌属)和酵母菌,总量不超过10%。
粪便中菌量和菌谱平时处于相对稳定状态,并与宿主间保持着生态平衡。
粪便中球菌(革兰阳性菌)和杆菌(革兰阴性菌)的比例大致为1∶10。
异常结果:
(1)长期使用广谱抗生素,免疫抑制剂及慢性消耗性疾病的患者,粪便中球/杆菌比值变大。
(2)在一定条件下,有些正常菌群的细菌也能致病,称为条件致病菌,如受凉或过度疲劳,抵抗力低下等。
(3)革兰阴性杆菌严重减少,甚至消失,而葡萄球菌或真菌等明显增多,常提示有肠道菌群紊乱或二重感染。此种菌群失调症称伪膜性肠炎,涂片常为革兰阳性葡萄球菌梭状芽胞杆菌(培养为金黄色葡萄球菌难辨芽胞梭菌等),次为假丝酵母菌。
需要检查人群:肠道细菌失衡患者,长期肚痛症状
检查时要求:
1.新配制的染液应先用已知的革兰氏阳性菌和阴性菌进行对照试验,以检查染色液的质量是否适用。
2.采集时请避免挖取沾到马桶內尿液及自来水的部分;同时也请勿将粪便直接置于卫生纸或擦手纸上。
3.为避免干扰检验结果,请勿使用棉花棒挖取。
4.粪便采集量请勿过少,以避免无足够的检体以供检验。
5.结晶紫与草酸铵溶液混合后不能保存太久,如有沉淀出现应重新配制使用。
6、粪便检验后应将纸类或塑料标本盒投程度焚化炉中烧毁。搪瓷容器应泡于消毒液中(如过氧乙酸、煤酚皂液或新洁尔灭等)24小时,弃消毒液后,流水冲洗干净备用。所用载上玻片需用5%煤酚皂液浸泡消毒。
检查前准备:
1、因为婴幼儿不容易一次取到足量的检体,若需要分次收集时,请将检体暂时置于冰箱冷藏保存,以避免细菌滋生。
2、蛔虫、蛲虫及绦虫等较大虫体或其片段肉眼即可分辨,钩虫虫体须将粪便冲洗过滤后方可见到,服驱虫剂后应检查粪便中有无虫体,驱绦虫后应仔细寻找虫头。
不适宜人群:本检查为常规检查,没有不适宜人群。
大便后,使用洁净容器取粪便表面未被污染部分,密封送检。
将新鲜大便直接涂抹在洁净的玻片上,粪便不可稀释以防细菌变形。标本务求新鲜,涂片厚薄适宜。
镜检 染色技术是诊断准确成功的关键,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌要对比鲜明。镜检时应将涂片视野全面观览,切不可看几个视野就计数或报告。
观察菌群涂片首先要总览细菌总数。了解涂片上细菌的数量是增多还是减少,有无优势菌或真菌。细菌总数过多的情况较少见或不易引起重视。菌群失调时细菌总数多在正常、减少或消失。