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化验检查
脱氧核糖核酸染色
介绍:

  

    脱氧核糖核酸是组成细胞核的成分,与特殊染液作用,被染成浅红色或紫红色。

正常值:

  

    幼稚血细胞脱氧核糖核酸颗粒堆积、聚集、染色深、成熟血细胞脱氧核糖核酸颗粒分布均匀,细小,染色浅。

临床意义:


    1.鉴别细胞的成熟程度,如小原粒细胞与成熟淋巴细胞的区别,小原粒细胞染色浅、核仁明显;淋巴细胞染色深。

    2.鉴别急性白血病的类型,原淋巴细胞反应较强,染色质染成粗颗粒;原粒细胞核反应减弱,染色质呈较淡的细颗粒状;原单核细胞反应最弱,染色质呈纤细网状,染色较浅。

    (1)急性淋巴细胞白血病(DNA颗粒粗、色深、核仁小而少)。

    (2)急性粒细胞白血病 (DNA颗粒细、色淡、核仁多而大)。

    (3)急性单核细胞白血病(DNA颗粒细、色淡、分布疏散)。

    3.鉴别巨幼红细胞与正常红细胞,巨幼红细胞核染色淡呈细网状,正常红细胞核染色深呈粗颗粒至块状。

注意事项:

  

    操作中4~6每次均需用0.1mol/L磷酸盐缓冲液冲洗2次,以免沉渣出现。浸入DAB溶液作用应避光操作。DAB为致癌剂应注意皮肤防护。

检查过程:


    (1)新鲜抗凝血标本,用比重1.077的淋巴细胞分离液作密度梯度分离,取淋巴细胞层细胞离心涂片,空气干燥。或不作细胞分离,直接涂片。

    (2)涂片用过氧化氢-甲醇液于4℃下固定20~30min,以阻断细胞的内源性过氧化酶。

    (3)涂片在0.1mol/L磷酸盐缓冲液中浸泡15min,滴加正常兔血清,以减少抗体非特异性结合。

    (4)滴加兔抗牛TdT抗体,37℃保温30min。

    (5)滴加羊抗兔IgG抗体,37℃保温30min。

    (6)滴加PAP免疫复合物,37℃保温30min。

    (7)将涂片浸入DAB溶液,室温作用5~10min。

    (8)水洗5min,干后镜检,或用哈氏苏木素染液复染胞核10min。