α2纤溶酶抑制物主要由肝脏合成,一种单链糖蛋白,是体内特异的抑制活性的丝氨酸蛋白酶,有限时性抑制纤溶酶的作用和抑制纤溶酶原与纤维蛋白结合,防止纤维蛋白被抗纤溶酶水解的作用。
1~12ng/ml。
(1)t-PA含量随年龄、剧烈运动和应激反应而增高,静脉滞留导致t-PA含量增加。
(2)先天性t-PA含量增高症。
(3)高血脂、肥胖症、口服避孕药、冠心病、心肌梗死、动脉血栓形成、缺血性中风等t-PA含量减低。
ELISA法是一项特异性和敏感性较高的免疫学试验。因此必须严格控制每项试验的条件。
(1)用0.05mol/L碳酸盐缓冲液稀释t-PA抗体。
(2)用稀释缓冲液稀释抗体-POD结合物。
(3)用基质缓冲液溶解邻苯二胺(8mg/ml),并加入10μl 30% H2O2。
(4)将t-PA标准倍比稀释成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125IU/ml。
(5)标本稀释:1份柠檬酸钠抗凝血浆加5份稀释液。如果估计t-PA值增高,血浆作1∶10稀释。
(6)用稀释之t-PA抗体包被ELISA反应板,每孔200μl,温育过夜,然后用洗涤液洗3次。
(7)加标准/标本200μl,温育1h后,同上洗涤3次。
(8)加过氧化物酶抗体复合物200μl,温育1h后,同上洗涤3次,洗后立即加基质。
(9)每孔加基质200μl,显色10~15min。
(10)加硫酸(3mol/L)50μl或盐酸(1mol/L)100μl,10min中止反应,于492nm,2h内比色,以稀释缓冲液为本底。
(11)据吸光度读数由标准曲线查得t-PA含量。